YMC Reversed-Phase Method Development

1. lépés: Mérési jellemzők

  • Megválasztandó applikációs paraméterek:
    • HPLC/UHPLC módszer?
    • Milyen detektorral? LC/MS?
    • Izokartikus vagy Grádiens elucióval?
  • Vizsgálandó komponens paraméterei:
    • Hidrofóbitás/polaritás/Ionosság
    • Molekula szerkezet/tömege
    • Stabilitás
    • Hogyan választhatóak el az egyes komponensek?
    • Mintamátrix

2. lépés: Screening

  • Legjellemzőbb „screening” paraméterek:
    • Meredek grádiens
    • Általában rövid oszlop, pl. 50 mm
    • Kolonna belső átmérője (ID) függ a komponenstől és a nyomástól
  • Javasolt YMC oszlopok:
    • YMC-Triart C18
    • YMC-Triart C18 ExRS
    • YMC-Triart C8
    • YMC-Triart Phenyl
    • YMC-Triart PFP
  • Javasolt mozgófázis oldószer:
    • Acetonitril
    • Metanol
    • Gradiens: 5-90% oldószer
  • Javasolt mozgófázis pH (oldat)
    • Savas
    • Semleges
    • Bázikus

3. lépés: Optimalizáció

  • Optimalizációs lehetőségek:
    • Mozgó fázis arány
    • Gradiens görbe/Izokratikus
    • Precíziós hőmérséklet beállítás
    • Kolonna paraméterek: állófázis, hossz, belső átmérő, részecskeméret, pórusméret
    • Módosító hozzáadása
    • pH